Che tipo di configurazione della fotocamera è necessaria per scattare foto di luciferase?


8

Sto lavorando con luciferase che ha una lunghezza d'onda di 480 nm blu e voglio poterne fare una foto. Il problema è che riesco a vedere la luciferase che brilla davanti a me in tutta la sua gloria, ma non importa quanto ci provi, non riesco a scattare una foto della luciferase con la mia DSLR (Nikon D80) usando un obiettivo Nikon da 50 mm e un obiettivo Nikon 35 mm. Ho provato a rimuovere i filtri (Nikon L37 e Hoya UV).

Sono curioso di sapere se mi manca un certo obiettivo / filtro o se dovrei scattare usando una diversa impostazione dell'illuminazione. Sto già esponendo per 30 "af / 22 su ISO 1600. Forse più a lungo?


Qual è la tua configurazione di illuminazione?
MikeW

Ho il sospetto che siano necessari tempi di esposizione molto più lunghi (. E nell'oscurità assoluta, come per esempio fotografare le stelle di notte. Immagino un EV -5 / -6, quindi hai bisogno di molte più soste per correggerlo. Quindi imposta l'ISO su 400 ad esempio e inizia con un tempo di esposizione di 1 minuto con un diafragma F / 4.0. Qualcosa di visibile? Riduci il tempo di 1 stop, nulla di visibile? Aumenta a 800 iso e così via, gioca con ISO e tempo per mantenere la qualità
Caspar Kleijne

In una stanza buia. come si confronta la luminosità con gli indici luminosi sul quadrante di un orologio da polso? Vedi la mia immagine qui sotto. Sospetto che la tua luciferase dovrebbe essere più luminosa di così.
Russell McMahon,

La luciferasi sarà effettivamente più opaca di un orologio da polso (a seconda delle concentrazioni). Sto usando una stanza completamente buia.
bobthejoe

1
No, non un idiota, sei stato abbastanza intelligente da trovarci per aiuto lol! Sono contento che funzioni ora.
MikeW

Risposte:


9

Quella lunghezza d'onda è certamente all'interno dello spettro che puoi catturare con qualsiasi obiettivo, con o senza filtri. I sensori digitali catturano tra 350-1000nm Se è incandescente, allora vorresti che fosse la tua fonte di luce principale. Qualsiasi luce aggiuntiva che proietti diluirà il bagliore del soggetto e renderà più difficile la visione.

Quale apertura stai usando? A meno che non sia incredibilmente debole, non riesco a immaginare 30 "di non catturare qualcosa se non stai usando un'apertura molto piccola.

Lo stai facendo in una stanza buia con uno sfondo scuro? Cosa vedi nelle tue esposizioni da 30 "?

Attraverso tentativi ed errori, è possibile eseguire una gamma di tempi di posa (e ISO) per provare a perfezionare un buon valore di esposizione. Se riesci a vederlo con gli occhi, dovresti essere in grado di fotografarlo senza attrezzature speciali.


Sto usando f22, ISO 1600. Anche io mi confonde.
bobthejoe

4
Oh cavolo, f / 22 - c'è il tuo problema. f / 22 con 30 secondi sicuramente non ce la farà. Apri il più possibile ( numeri f inferiori ) il più possibile - almeno per iniziare. f / 22 significa sostanzialmente che c'è una luce stenopeica che attraversa.
rfusca,

8

Se hai altra luce presente, può facilmente "lavare" la luminescenza di basso livello. Non dovresti avere altra luce per iniziare.

Metti a fuoco con una luce accesa. Utilizzare la messa a fuoco manuale o, se la fotocamera lo consente, impostare la messa a fuoco manuale, passare temporaneamente alla messa a fuoco automatica, mettere a fuoco e quindi tornare a MF in modo da mettere a fuoco la fotocamera.

Quindi spegni le altre luci in modo che la luciferase sia l'unica fonte di illuminazione, esponi da lì e vedi cosa ottieni.

Se ciò non funziona, l'esposizione manuale e la messa a fuoco manuale consentono di controllare ciò che fa la fotocamera e di esporre attraverso una gamma di esposizioni probabili.

Ho appena provato a fotografare il mio quadrante non particolarmente luminoso nel buio totale. A 250 mm e guarda a circa 500 mm di distanza, quindi l'orologio ha riempito 1/3 della larghezza di esposizione del fotogramma era di 6 secondi a f5,6 a 800 ISO. I singoli indici delle ore, che non sono molto luminosi alla luce della stanza, si illuminano intensamente nella foto quando sono l'unica fonte di luce.

Questa convenzione. Focusing "avrebbe potuto essere notevolmente migliore [tm] :-)

6S, f5.6, ISO800.

inserisci qui la descrizione dell'immagine

Le domande chiave sono: stai usando altra illuminazione e cosa stai vedendo nelle tue immagini.

Queste molte immagini di Luciferase suggeriscono un livello di luce ragionevole e non sembrano essere difficili da fotografare.

Utilizzando il nostro sito, riconosci di aver letto e compreso le nostre Informativa sui cookie e Informativa sulla privacy.
Licensed under cc by-sa 3.0 with attribution required.